Thèse Vers une Alternative aux Perfusions Plasmatiques dans le Déficit en Facteur V Nouvelles Approches Ciblées H/F

Université Paris-Saclay GS Santé et médicaments

Résumé:

Le déficit sévère en facteur V (FV) demeure une pathologie rare pour laquelle les options thérapeutiques sont limitées. Le traitement repose essentiellement sur l'administration de plasma frais congelé, une approche contraignante, non spécifique et associée à des risques transfusionnels. Les patients présentant un déficit modéré ou mineur ne disposent, quant à eux, d'aucune stratégie prophylactique efficace. La répétition de saignements mineurs non traités altère significativement leur qualité de vie, tant sur le plan physique que psychologique, avec un impact particulièrement marqué chez les femmes et les adolescentes en raison de ménorragies fréquentes. Contrairement aux hémophilies A et B, qui ont bénéficié ces dernières années d'innovations thérapeutiques majeures, le déficit en FV reste dépourvu d'approches ciblées et modernes.
Ce projet vise à développer des stratégies thérapeutiques innovantes permettant de restaurer l'équilibre hémostatique chez les patients atteints de déficit en FV selon trois approches complémentaires :
Prolongation et stabilisation du FV résiduel par le développement d'un anticorps bispécifique à domaine unique (SdAb) agissant comme pont moléculaire entre l'albumine circulante et le FV déficitaire, afin d'augmenter sa demi-vie et son efficacité fonctionnelle chez les patients atteints de formes mineures ou modérées.
Substitution fonctionnelle du cofacteur FV via un SdAb bispécifique capable de mimer l'activité cofacteur du FV en établissant une double interaction avec le facteur X activé (FXa) et la prothrombine (PT), favorisant ainsi la génération de thrombine indépendamment du FV endogène.
Rééquilibrage de la balance hémostatique par l'utilisation d'approches développées pour les hémophilies avec inhibiteurs (anticorps ou siRNA ciblant les anticoagulants naturels), afin de compenser le déficit en FV en modulant les voies régulatrices de la coagulation.
Ces stratégies seront évaluées de manière intégrée à l'aide de modèles in vitro (tests plasmatiques, génération de thrombine) et in vivo (modèles murins de déficit en FV), avec pour objectif de proposer des alternatives innovantes aux perfusions répétées et d'améliorer durablement la prise en charge des patients.
Le projet sera conduit au sein de l'Unité INSERM U1176, dirigée par le Dr. Cécile Denis, qui dispose d'une plateforme spécialisée dans le développement de nanobodies et d'une expertise reconnue dans l'évaluation préclinique de molécules ciblant les désordres de l'hémostase. L'encadrement scientifique sera assuré par le Dr Olivier Christophe en collaboration étroite avec le Dr. Peter Lenting, experts des modèles expérimentaux de coagulation.
Une forte dimension translationnelle sera garantie par la collaboration avec les Centres de Traitement de l'Hémophilie du CHU Necker-Enfants Malades et du CHU Bicêtre, permettant un accès encadré à des échantillons biologiques de patients atteints de déficit en FV ainsi qu'un appui clinique pour l'interprétation des résultats.
Ce projet ambitionne ainsi de combler un vide thérapeutique majeur dans le déficit en facteur V en développant des approches innovantes, mécanistiquement fondées et à fort potentiel translationnel.

Le déficit en facteur V (FV), ou maladie d'Owren, est un trouble hémorragique autosomique récessif extrêmement rare (1 cas pour un million de naissances). L'absence totale de FV est incompatible avec la vie (1), tandis qu'un déficit sévère (FV:C <10 %) entraîne des hémorragies imprévisibles et parfois mortelles. Sur le plan clinique, le déficit en FV provoque principalement des saignements muqueux et post-traumatiques, et sa gravité est peu corrélée aux taux plasmatiques de FV, car le FV plaquettaire, qui représente environ 20 % du FV total, est essentiel à la génération physiologique de thrombine et à la formation stable de caillots (2-4). Chez certains patients, le soulagement partiel des symptômes hémorragiques est paradoxalement associé à une réduction de l'inhibiteur de la voie du facteur tissulaire ou TFPI (5). Les complications comprennent les hémorragies intracrâniennes, la ménorragie et les accidents obstétricaux.
Contrairement à l'hémophilie A et B, où les traitements non factoriels (émicizumab, anticorps anti-TFPI, fitusiran) ont révolutionné les soins (6), il n'existe aucun traitement spécifique, ciblé ou prophylactique pour le déficit en FV. La prise en charge repose exclusivement sur le plasma frais congelé (PFC), parfois associé à une transfusion de plaquettes (7). Le PFC comporte des risques bien connus (réactions transfusionnelles, surcharge volumique, TRALI, infection) et ne convient pas à une prophylaxie à long terme. Les femmes et les filles souffrent d'une morbidité importante due à des saignements récurrents, notamment des saignements menstruels abondants. Cette situation met en évidence un besoin médical critique non satisfait : le développement d'un traitement prophylactique ou à la demande sous-cutané efficace et peu contraignant pour les patients atteints d'un déficit en FV.

Ce projet a pour objectif de combler un vide thérapeutique dans une maladie hémorragique très rare (prévalence 1/1 000 000) en développant des approches innovantes fondées sur des anticorps bispécifiques et des stratégies de rééquilibrage de l'hémostase.

Le projet repose sur une approche expérimentale, préclinique et translationnelle, articulée autour de trois axes thérapeutiques complémentaires.

1 - Conception et production de biothérapies innovantes

Développement de nanobodies (SdAb) bispécifiques selon trois stratégies :

a) Prolongation du FV résiduel :
Conception d'un SdAb capable de lier simultanément le facteur V déficitaire et l'albumine circulante afin d'augmenter sa demi-vie et sa stabilité plasmatique.

b) Substitution fonctionnelle du FV :
Développement d'un SdAb mimant l'activité cofacteur du FV en établissant un pont entre le facteur X activé (FXa) et la prothrombine pour restaurer la génération de thrombine.

c) Rééquilibrage hémostatique :
Application d'approches inspirées des thérapies des hémophilies (anticorps ou siRNA ciblant les anticoagulants naturels) afin de compenser indirectement le déficit en FV.

Ces molécules seront produites, purifiées et caractérisées biochimiquement (affinité, stabilité, spécificité).

2 - Évaluation fonctionnelle in vitro

Analyse de l'efficacité biologique via :

-Tests plasmatiques de coagulation

-Tests de génération de thrombine

-Études mécanistiques des interactions moléculaires

Objectif : démontrer la restauration de l'activité coagulante et caractériser le mode d'action.

3 - Validation préclinique in vivo

Utilisation de modèles murins de déficit en facteur V pour :

-Évaluer la correction du phénotype hémorragique

-Mesurer la réduction des temps de saignement

-Étudier la pharmacocinétique et la tolérance

-Analyser le risque thrombotique éventuel

4 - Dimension translationnelle

Collaboration de l'INSERM U1176 avec les centres de références de l'hémophilie du CHU Necker-Enfants Malades et du CHU Bicêtre.

Ces collaborations permettront :

-L'accès à des échantillons biologiques de patients,

-La validation des approches sur plasma humain,

-L'interprétation clinique des résultats.

En résumé : la méthode consiste au développement de biothérapies innovantes (nanobodies bispécifiques), validation in vitro et in vivo, approche translationnelle intégrée.