Apprenti Assistant Ingénieur en Biotechnologie H/F

CNRS

Le plateau Analyse et Valorisation de la Biodiversité (AVB) est rattaché à l'équipe BiosCiences du laboratoire iSm2. Il est en charge de la surproduction/purification de diverses protéines recombinantes dans les projets de biologie de synthèse de l'équipe.
L'apprenti(e) sera impliqué dans la production à grande échelle (gramme) de plusieurs variants d'une métalloenzyme à Cuivre, la Laccase, grâce à un mode de culture en bioréacteurs d'un hôte eucaryote : Aspergillus niger.
Il/Elle aura plus précisément pour mission :
- la transformation du champignon filamenteux Aspergillus niger par un plasmide portant le gène laccase muté et ainsi la construction d'une collection de variants de laccase,
- la sélection du meilleur transformant pour chaque variant par des techniques de culture en deepwell, des mesures d'activité spécifique voir de la quantification du niveau de transcrit,
- la suproduction des protéines mutées sécrétées par le champignon filamenteux Aspergillus niger en culture de 10L en bioréacteur,
- la purification des protéines par plusieurs techniques de chromatographie en FPLC
- le contrôle qualité des protéines purifiées par des techniques d'électrophorèse (SDSPage), d'immunodétection (Western Blot) et de spectroscopie.
- la conservation des protéines pures et la gestion du stock.
L'apprenti(e) sera impliqué également dans la gestion du plateau AVB et des tâches communes du laboratoire, ce qui contribuera à sa bonne intégration.