Thèse Développement Préclinique d'Une Thérapie Antisens Combinée pour le Traitement de la Dystrophie Musculaire de Duchenne H/F

Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université Paris-Saclay GS Life Sciences and Health École doctorale : Innovation thérapeutique : du fondamental à l'appliqué Laboratoire de recherche : Innovation thérapeutique : de la physiopathologie à l'appliqué dans les pathologies neuro-Musculaires, la rePROduction et le déVEloppement Direction de la thèse : Aurélie GOYENVALLE ORCID 0000000339381165 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-04-27T23:59:59 La dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) est une maladie génétique sévère caractérisée par une dégénérescence musculaire progressive et une mortalité précoce. Les thérapies génétiques, notamment le saut d'exon médié par des oligonucléotides antisens (ASO) et les thérapies géniques basées sur les vecteurs adéno-associés (AAV) exprimant une micro-dystrophine, représentent des avancées majeures dans le traitement de la DMD. Quatre médicaments à base d'ASO et une thérapie génique basée sur les AAV sont déjà approuvés aux États-Unis et au Japon, tandis que plusieurs autres approches sont en cours de développement clinique avancé.
Cependant, malgré ces progrès, le bénéfice clinique de ces thérapies reste limité, en grande partie en raison d'une restauration insuffisante de la dystrophine dans les muscles squelettiques, liée à une faible pénétration dans les tissus ou à une altération de la qualité musculaire. Par ailleurs, l'inflammation chronique et la fibrose contribuent de manière significative à la dégénérescence musculaire progressive observée dans la DMD. Plusieurs facteurs impliqués dans le processus fibrotique ont été identifiés, notamment dans le modèle murin mdx de la maladie.
Dans ce projet, nous étudierons l'impact de la diminution de l'expression de certains de ces facteurs sur l'histopathologie des muscles dystrophiques, en utilisant un siRNA ciblant le muscle dans le modèle murin D2-mdx. Grâce à une collaboration établie avec Alnylam Pharmaceuticals, nous utiliserons des petits ARN interférents (siRNA) chimiquement optimisés pour un ciblage musculaire efficace.
Le projet s'articule autour de deux objectifs principaux : (1) caractériser l'impact de la diminution de la fibrose médiée par siRNA sur l'architecture et la fonction musculaires dans le modèle murin D2-mdx de la DMD ; (2) évaluer si la combinaison de la réduction de la fibrose avec des thérapies géniques basées sur les ASO ou les AAV permet d'améliorer la restauration de la dystrophine et les bénéfices fonctionnels.
En ciblant une barrière intrinsèque à la maladie plutôt que les agents thérapeutiques eux-mêmes, ce projet propose une stratégie innovante et largement applicable pour améliorer l'efficacité des thérapies génétiques dans la DMD. Cette approche présente un fort potentiel translationnel et pourrait bénéficier non seulement aux thérapies par saut d'exon, mais également à d'autres traitements administrés par voie systémique dans les maladies neuromusculaires.

Le doctorant sera accueilli dans l'Unité IMPROVE (UMR 1357 INSERM - UVSQ), dirigée par Aurélie Goyenvalle, et spécialisée dans les thérapies géniques et les technologies antisens pour les maladies neuromusculaires comme la DMD. Forte de son expertise en saut d'exon via AAV et ASO, l'équipe a mené des recherches précliniques jusqu'à un essai clinique lancé en 2023 (brevet WO/2022/073920) et maîtrise l'ensemble des techniques nécessaires au projet (production d'AAV, analyses moléculaires, modèles murins). Les objectifs de ce projet de thèse sont d'évaluer le potentiel thérapeutique d'une nouvelle stratégie combinant l'approche de saut d'exon thérapeutique avec l'inhibition de facteurs fibrotiques, permettant d'améliorer la biodistribution des oligonucléotides antisens aux muscles cibles et ainsi d'augmenter la restauration de dystrophine. - Evaluation et caractérisation de la down-régulation induite par les siRNA in vitro dans des cellules endothéliales murines (transfection et screen de siRNA, RT-qPCR, Elisa, western blot)
- Evaluation et caractérisation de la down-régulation in vivo dans un modèle murin de DMD (injection de siRNA, prélèvements de plasma et de tissus, RT-qPCR, Elisa, western blot, immunohistochimie et analyse de l'histopathologie musculaire)
- Evaluation de l'efficacité d'une approche combinant saut d'exon thérapeutique et inhibition de la fibrose in vivo dans des modèles murins de DMD (injections, prélèvement et congélation de tissus, RT-qPCR, Elisa, immunohistochimie, évaluations fonctionnelles in vivo, etc.)