Thèse Comprendre et Cibler la Communication Médiée par les Vésicules Extracellulaires dans la Leucémie Myéloïde Aiguë Mutée Tp53 H/F

Aix Marseille Université

Établissement : Aix Marseille Université
École doctorale : Recherches Biomédicales
Laboratoire de recherche : CRCM - Centre de Recherche en Cancérologie de Marseille
Direction de la thèse : Christophe LACHAUD ORCID 0000000327621619
Début de la thèse : 2026-10-01
Date limite de candidature : 2026-04-27T23:59:59

La leucémie aigüe myéloïde (LAM) est une maladie maligne hétérogène de la moelle osseuse (MO), caractérisée par l'expansion clonale de cellules hématopoïétiques immatures, perturbant ainsi l'hématopoïèse normale. La LAM avec mutation de TP53 (mutTP53) représente 5 à 15 % des cas (jusqu'à 30 % chez les personnes âgées). Elle est hautement agressive et résistante aux thérapies standards, y compris les combinaisons à base de venetoclax. La survie médiane n'est que de 6 à 7 mois, avec des taux de survie à 3 ans souvent inférieurs à 10 %. Les taux de rémission sont faibles, les rechutes fréquentes (environ 68 %), et les guérisons durables sont rares. Aucune thérapie ciblée efficace n'existe pour ce sous-type, soulignant un besoin urgent de nouvelles approches thérapeutiques (1).

Les vésicules extracellulaires (VE), médiateurs clés de la communication intercellulaire, émergent désormais comme des acteurs de la résistance aux thérapies dans la LAM. En effet, il a été démontré que les VE dérivées de la LAM favorisent le transfert horizontal de signaux qui améliorent la tolérance aux dommages de l'ADN, l'efflux des médicaments et la survie des cellules leucémiques. Elles livrent également des facteurs qui reprogramment la MO en une niche pro-leucémique protectrice. Les VE dérivées de la LAM perturbent aussi directement l'hématopoïèse normale. Bien que l'implication des VE dans la leucémie soit bien reconnue, leur rôle spécifique dans la LAM mutTP53 reste largement inconnu (2-3).

Nous avons commencé à explorer le rôle des VE mutTP53 dans la progression de la LAM : nous avons réalisé une analyse protéomique comparative des VE isolées à par des cellules MOLM13 'sauvages' (WT), TP53 KO et mutTP53. Cette analyse nous montre des changements significatifs dans la composition des VE des cellules TP53 mutées et KO, avec notamment un enrichissement en protéines de réparation de l'ADN (par exemple, PARP2 et LIG1) et en protéines lié au métabolisme OXPHOS. Des expériences complémentaires, nous ont permis de constater que le milieu conditionné isolé à partir de cellules MOLM13 TP53-KO augmente la résistance des cellules MOLM13 WT aux traitements standards (AraC et venetoclax), un effet partiellement perdu après la déplétion des VE.

Notre hypothèse est donc que les VE mutTP53 favorisent la résistance aux thérapies de la LAM en transférant notamment des signaux liés aux dommages de l'ADN (DDR) et au métabolisme OXPHOS aux cellules leucémiques et de la MO, renforçant ainsi la résistance intrinsèque et reprogrammant la niche pour induire une résistance extrinsèque.

Par conséquent, notre projet repose sur deux objectifs principaux :
1. Définir le rôle des VE mutTP53 dans la progression de la LAM et la résistance intrinsèque.
2. Étudier le rôle des VE dérivées de la LAM mutTP53 dans le remodelage de la niche et la résistance extrinsèque aux thérapies.

Dans son ensemble, cette approche pourrait potentiellement permettre l'identification de nouveaux biomarqueurs pour la LAM mutTP53 et révéler de nouvelles cibles thérapeutiques pour prévenir la résistance au traitement.

L'incidence de la leucémie aigüe myéloïde (LAM) est en constante augmentation, avec plus de 3 000 nouveaux cas chaque année en France. La majorité des patients sont âgés (l'âge médian au diagnostic est de 68 ans), et les cas avec mutation de TP53 sont particulièrement fréquents dans ce groupe (30 %). Dans un contexte de vieillissement de la population, le nombre de patients atteints de la LAM continuera d'augmenter, soulignant ainsi l'urgence de développer des thérapies innovantes.

1. Définir le rôle des VE mutTP53 dans la progression de la LAM et la résistance intrinsèque.
2. Étudier le rôle des VE dérivées de la LAM mutTP53 dans le remodelage de la niche et la résistance extrinsèque aux thérapies.

Dans le cadre de ce projet, nous utiliserons les lignées cellulaires MOLM13 et K562 (les modèles WT, TP53-KO et six mutants distincts de TP53) ainsi qu'un modèle murin de LAM mutée TP53 (JAK2V617FTrp53R172H), développé en collaboration avec l'équipe d'I.Antony-Debré (IGR). Les résultats obtenus seront validés à l'aide de modèles PDX (plateforme TrGET) et d'échantillons de patients issus des cohortes HEMATO-BIO-IPC 2013-015 et HEMATOBIO.02-IPC 2021-061, en collaboration avec S. Garciaz (IPC).
Ce projet permettra de développer des compétences techniques avancées, notamment en culture cellulaire, en cytométrie en flux (conventionnelle et spectrale), ainsi qu'en isolation et caractérisation des vésicules extracellulaires (VE). Il intégrera également une expertise en analyses métaboliques (plateforme Seahorse) et en isolation de progéniteurs murins portant les mutations JAK2V617FTrp53R172H, suivie d'essais fonctionnels in vitro (tests de formation de colonies en méthylcellulose). Enfin, des analyses omiques - incluant l'étude du surfaceome et du secretome - seront réalisées grâce à la plateforme de protéomique du CRCM.